Il dipinto si presenta come una tradizionale sacra conversazione, in uno spazio absidale chiuso ai lati da elementi architettonici, con santi che sfoggiano i loro attributi tradizionali, dal porco selvatico e dal bastone del "tau" del monaco eremita Antonio Abate, alle mammelle raccolte in una coppa della martire Agata, alla piccola croce del Battista fanciullo, antecedente della croce astile della maturità. Cifra caratteristica di questa opera giovanile del Roncalli, da datare al 1576, è la grazia e la morbida armonia e calibrata convivenza delle figure, all'interno di uno spazio neutro, interrotto unicamente dall'inserzione del trono della Vergine che emerge garbatamente dall'oscurità del fondo. Come affermato anche dal Carli che parla per questo dipinto di "una delle più felici e aggraziate creazioni di questo Maestro, sotto il prevalente influsso del Beccafumi" (1989, p. 57). Il Roncalli, infatti, era stato introdotto nell'ambiente senese dall'Agostini, rettore del Duomo, nel cui palazzo, oggi Sergardi Bindi, l'artista doveva affrescare un salone con storie mitologiche.In particolare, il volto di Agata richiamerebbe l'Annunciata di San Martino a Sartiano. Ed è caratteristico anche il san Giovannino paffuto e cordiale, che precorre i putti successivi del Roncalli e che richiam