In alto al centro, su nuvola da cui sporgono volti di angioletti, la Madonna seduta tiene in grembo Gesù Cristo Bambino e posa la destra sulla spalla di San Giovanni fanciullo che, in piedi, ha tra le mani la croce e volge il capo in basso a sinistra; il gruppo è avvolto da un alone di raggi luminosi. In basso, inginocchiati in primo piano, scorciati e con i paramenti da vescovo sono a destra San Benedetto e a sinistra San Paterio: entrambi guardano in alto. Dietro ad essi, in piedi e scorciate, sono Santa Eufemia a destra, con palma nella sinistra e sguardo verso l'alto, e Santa Giustina a sinistra, con palma nella destra, sega nella sinistra e volto verso San Paterio. La scena si svolge sotto la campata in prospettiva di un portico con volta a crociera, aperta su un paesaggio collinare, con torrente tortuoso, fortificazioni, cielo e nuvole bianche.