La scena, bipartita da una struttura architettonica a due arcate su pilastri bianchi paralleli ai costoloni della volta, rappresenta sulla sinistra la Madre di Maria Vergine, seduta sul letto subito dopo il parto, vestita con una semplice camicia bianca. Il letto ha le lenzuola rosse e una coperta azzurra. Sant'Anna è assistita da un'ancella che le porge un piatto con la mano sinistra e un bicchiere con la destra; essa indossa una veste rosso scuro ed ha una fascia bianca fra i capelli. Dietro di lei, un po' discosto, San Gioacchino osserva la scena. Nella parte destra del dipinto si vedono due ancelle che accudiscono Maria appena nata, posata dentro una vasca; l'ancella di sinistra ha una veste verde con lunghe maniche bianche, quella di destra ha l'abito rosso con lunghe maniche blu ed ha steso fra le mani un telo bianco con il quale si appresta ad asciugare la Neonata. La stanza ha come sfondo una parete sulla quale si apre una monofora con grata bianca affacciata al cielo notturno